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超高压食品灭菌设备实验设备处理材料时发生哪些生物化学反应?
自然界存在大量的自发过程,例如水由高处向低处的自发流动;热由高温物体向低温物体的自发传递;铁在潮湿空气中会自动生锈;强酸和强碱水溶液相混合会自动发生中和反应等。
自发过程必须具备以下几个条件
(1)单向性,自动地向一个方向进行,不会自动地逆向进行。若要逆向进行,需要外力作功。
(2)具有作功的潜能。如由山上滚下的石头可推动其它物体运动作功。
(3)具有一定限度,如石头滚到山脚下,即不再滚动,达到平衡。
如果在等温等压系统中有化学反应发生,那末反应的Gibbs自由能变化△G是该反应自发进行方向的热力学判据。自发反应总是向减少系统总的Gibbs自由能的方向进行的。因此,化学反应发生一个反应式的量变时,Gibbs自由能变化△Gm是一个重要的参数,它的负值被定义为化学反应的亲和势(affinity)A也被称为反应的推动力(driving force)。
一般认为在超高压条件下,生物体高分子立体结构中的氢键结合、疏水结合、离子结合等非共有结合发生变化,使蛋白质变性,淀粉糊化,酶失活,细胞膜破裂,菌体内成分泄漏,生命活动停止,微生物菌体破坏而死亡。蛋白质的氨基酸的缩氨结合、维生素、香气成分等低分子化合物是共有结合,在超高压下不会破坏、得以完整地保留。根据实验结果证明,一般情况下200-300Mpa病毒灭活;300-400 Mpa霉菌、酵母菌灭活;300-600 Mpa细菌、致病菌灭活;800-1000 Mpa芽孢灭活;低压下酶活性增强,超过400 Mpa酶失活;400 Mpa以上蛋白质三、四级结构破坏,发生不可逆变性;400-600 Mpa淀粉氢键断裂,并糊化。
超高压条件下的蛋白质变性
蛋白质变性(denaturation)
天然蛋白质的严密结构在某些物理或化学因素作用下,其特定的空间结构被破坏,从而导致理化性质改变和生物学活性的丧失,如酶失去催化活力,激素丧失活性称之为蛋白质的变性作用。蛋白质变性后,分子结构松散,不能形成结晶,溶解度降低,同时蛋白质的粘度增加,生物学活性丧失,易被蛋白酶水解。
蛋白质的变性作用主要是由于蛋白质分子内部的结构被破坏。天然蛋白质的空间结构是通过氢键等次级键维持的,而变性后次级键被破坏,蛋白质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序的松散的伸展状结构(但一级结构并未改变)。所以,原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面,而亲水基团在表面的分布则相对减少,至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜,很容易引起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
超高压实验设备引起蛋白质变性的原因分为物理和化学因素两类。物理因素除了加热、加压之外还有紫外线照射、超声波的作用等;化学因素有强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二烷基磺酸钠(SDS)等。
变性并非是不可逆的变化,当变性程度较轻时,如去除变性因素,有的蛋白质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能,变性的可逆变化称为复性(renaturation)。许多蛋白质变性时被破坏严重,不能恢复,称为不可逆性变性。
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